U prethodnom projektu testiranja lokalnih tvornica za preradu hrane za komarce u Tajlandu, utvrđeno je da eterična ulja (EO) Cyperus rotundus, galangal i cimet imaju dobro djelovanje protiv komaraca protiv Aedes aegypti.U pokušaju smanjenja uporabe tradicionalnihinsekticidii poboljšati kontrolu populacije otpornih komaraca, ova je studija imala za cilj identificirati potencijalni sinergizam između adulticidnih učinaka etilen oksida i toksičnosti permetrina na Aedes komarce.aegypti, uključujući sojeve otporne na piretroide i osjetljive.
Za procjenu kemijskog sastava i uništavajuće aktivnosti EO ekstrahiranog iz rizoma C. rotundus i A. galanga i kore C. verum protiv osjetljivog soja Muang Chiang Mai (MCM-S) i otpornog soja Pang Mai Dang (PMD-R ).) Adult aktivne Ae.Aedes aegypti.Biotest mješavine EO-permetrina kod odraslih osoba također je obavljen na tim Aedes komarcima kako bi se razumjelo njihovo sinergijsko djelovanje.aegypti sojevi.
Kemijska karakterizacija GC-MS analitičkom metodom pokazala je da je 48 spojeva identificirano iz EO C. rotundus, A. galanga i C. verum, što čini 80,22%, 86,75% odnosno 97,24% ukupnih komponenti.Ciperen (14,04%), β-bisabolen (18,27%) i cinamaldehid (64,66%) glavne su komponente ulja ciperusa, ulja galangala i balzamičnog ulja.U biološkim testovima ubijanja odraslih, C. rotundus, A. galanga i C. verum EV bili su učinkoviti u ubijanju Ae.aegypti, MCM-S i PMD-R vrijednosti LD50 bile su 10,05 i 9,57 μg/mg žene, 7,97 i 7,94 μg/mg žene, odnosno 3,30 i 3,22 μg/mg žene.Učinkovitost MCM-S i PMD-R Ae u ubijanju odraslih jedinki.aegypti u ovim EO bio je blizak piperonil butoksidu (vrijednosti PBO, LD50 = 6,30 odnosno 4,79 μg/mg za žene), ali ne toliko izražen kao permetrin (vrijednosti LD50 = 0,44 odnosno 3,70 ng/mg za žene).Međutim, kombinirani biološki testovi pronašli su sinergiju između EO i permetrina.Značajan sinergizam s permetrinom protiv dva soja komaraca Aedes.Aedes aegypti zabilježen je u EM-u C. rotundus i A. galanga.Dodatak ulja C. rotundus i A. galanga značajno je smanjio LD50 vrijednosti permetrina na MCM-S s 0,44 na 0,07 ng/mg odnosno 0,11 ng/mg kod ženki, uz vrijednosti omjera sinergije (SR) od 6,28 odnosno 4,00.Uz to, C. rotundus i A. galanga EO također su značajno smanjili LD50 vrijednosti permetrina na PMD-R s 3,70 na 0,42 ng/mg odnosno 0,003 ng/mg kod ženki, s SR vrijednostima od 8,81 i 1233,33, odnosno..
Sinergistički učinak kombinacije EO-permetrin za povećanje toksičnosti odraslih protiv dva soja komaraca Aedes.Aedes aegypti pokazuje obećavajuću ulogu etilen oksida kao sinergista u poboljšanju učinkovitosti protiv komaraca, posebno tamo gdje su tradicionalni spojevi neučinkoviti ili neprikladni.
Komarac Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) glavni je vektor denga groznice i drugih zaraznih virusnih bolesti kao što su žuta groznica, chikungunya i Zika virus, predstavljajući veliku i trajnu prijetnju ljudima [1, 2]..Virus denga groznice najozbiljnija je patogena hemoragijska groznica koja pogađa ljude, s procijenjenim 5-100 milijuna slučajeva godišnje i više od 2,5 milijarde ljudi diljem svijeta u opasnosti [3].Epidemije ove zarazne bolesti predstavljaju veliki teret za stanovništvo, zdravstvene sustave i gospodarstva većine tropskih zemalja [1].Prema tajlandskom ministarstvu zdravstva, bilo je 142 925 slučajeva denga groznice i 141 smrtnih slučajeva prijavljenih širom zemlje u 2015., što je više od tri puta više od broja slučajeva i smrti u 2014. [4].Unatoč povijesnim dokazima, komarac Aedes iskorijenio je ili znatno smanjio denga groznicu.Nakon kontrole Aedes aegypti [5], stope zaraze dramatično su porasle i bolest se proširila po cijelom svijetu, dijelom zbog desetljeća globalnog zatopljenja.Eliminacija i kontrola Ae.Aedes aegypti je relativno težak jer je domaći komarac vektor koji se pari, hrani, odmara i polaže jaja u i oko ljudskog prebivališta tijekom dana.Osim toga, ovaj komarac ima sposobnost prilagodbe promjenama u okolišu ili poremećajima uzrokovanim prirodnim događajima (kao što je suša) ili ljudskim mjerama kontrole, te se može vratiti na svoju početnu brojnost [6, 7].Budući da su cjepiva protiv denga groznice tek nedavno odobrena i ne postoji poseban tretman za denga groznicu, sprječavanje i smanjenje rizika od prijenosa denga groznice u potpunosti ovisi o kontroli komaraca vektora i uklanjanju ljudskog kontakta s vektorima.
Konkretno, upotreba kemikalija za kontrolu komaraca sada igra važnu ulogu u javnom zdravstvu kao važna komponenta sveobuhvatnog integriranog upravljanja vektorima.Najpopularnije kemijske metode uključuju upotrebu niskotoksičnih insekticida koji djeluju protiv ličinki komaraca (larvicidi) i odraslih komaraca (adidocidi).Kontrola ličinki kroz smanjenje izvora i redovitu upotrebu kemijskih larvicida kao što su organofosfati i regulatori rasta insekata smatra se važnim.Međutim, nepovoljni utjecaji na okoliš povezani sa sintetičkim pesticidima i njihovo radno intenzivno i složeno održavanje i dalje predstavljaju veliki problem [8, 9].Tradicionalna aktivna kontrola vektora, kao što je kontrola odraslih, ostaje najučinkovitije sredstvo kontrole tijekom izbijanja virusa jer može iskorijeniti vektore zaraznih bolesti brzo i u velikim razmjerima, kao i smanjiti životni vijek i dugovječnost lokalne populacije vektora [3]., 10].Četiri klase kemijskih insekticida: organoklorovi (nazivaju se samo DDT), organofosfati, karbamati i piretroidi čine osnovu programa za kontrolu vektora, pri čemu se piretroidi smatraju najuspješnijom klasom.Vrlo su učinkoviti protiv raznih člankonožaca i imaju nisku učinkovitost.toksičnost za sisavce.Trenutno sintetski piretroidi čine većinu komercijalnih pesticida, čineći oko 25% svjetskog tržišta pesticida [11, 12].Permetrin i deltametrin su piretroidni insekticidi širokog spektra koji se desetljećima koriste širom svijeta za suzbijanje raznih štetnika od poljoprivrednog i medicinskog značaja [13, 14].U 1950-ima, DDT je odabran kao kemikalija izbora za tajlandski nacionalni javnozdravstveni program kontrole komaraca.Nakon raširene uporabe DDT-a u područjima endemskim malarijom, Tajland je postupno ukinuo upotrebu DDT-a između 1995. i 2000. godine i zamijenio ga s dva piretroida: permetrinom i deltametrinom [15, 16].Ovi piretroidni insekticidi uvedeni su ranih 1990-ih za kontrolu malarije i denga groznice, prvenstveno tretiranjem mreža za krevet i upotrebom toplinske magle i sprejeva ultraniske toksičnosti [14, 17].Međutim, izgubili su učinkovitost zbog jake otpornosti na komarce i nedostatka javne usklađenosti zbog zabrinutosti za javno zdravlje i utjecaj sintetičkih kemikalija na okoliš.To predstavlja značajne izazove za uspjeh programa kontrole vektora prijetnji [14, 18, 19].Kako bi strategija bila učinkovitija, potrebne su pravovremene i odgovarajuće protumjere.Preporučeni postupci upravljanja uključuju zamjenu prirodnih tvari, rotaciju kemikalija različitih klasa, dodavanje sinergista i miješanje kemikalija ili istovremenu primjenu kemikalija različitih klasa [14, 20, 21].Stoga postoji hitna potreba za pronalaženjem i razvojem ekološki prihvatljive, prikladne i učinkovite alternative i sinergista, a ova studija ima za cilj odgovoriti na tu potrebu.
Insekticidi prirodnog podrijetla, posebno oni temeljeni na biljnim komponentama, pokazali su potencijal u procjeni sadašnjih i budućih alternativa za kontrolu komaraca [22, 23, 24].Nekoliko je studija pokazalo da je moguće kontrolirati važne vektore komaraca korištenjem biljnih proizvoda, posebice eteričnih ulja (EO), kao ubojica odraslih osoba.Adulticidna svojstva protiv nekih važnih vrsta komaraca pronađena su u mnogim biljnim uljima kao što su celer, kumin, cedoaria, anis, papar, majčina dušica, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata i Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].Etilen oksid se sada ne koristi samo sam, već iu kombinaciji s ekstrahiranim biljnim tvarima ili postojećim sintetskim pesticidima, proizvodeći različite stupnjeve toksičnosti.Kombinacije tradicionalnih insekticida kao što su organofosfati, karbamati i piretroidi s etilen oksidom/biljnim ekstraktima djeluju sinergistički ili antagonistički u svojim toksičnim učincima i pokazali su se učinkovitima protiv vektora bolesti i štetnika [31,32,33,34,35].Međutim, većina studija o sinergističkim toksičnim učincima kombinacija fitokemikalija sa ili bez sintetskih kemikalija provedena je na poljoprivrednim kukcima vektorima i štetočinama, a ne na medicinski važnim komarcima.Štoviše, većina rada o sinergističkim učincima kombinacija biljno-sintetskih insekticida protiv vektora komaraca usmjerena je na larvicidni učinak.
U prethodnoj studiji koju su proveli autori kao dio tekućeg istraživačkog projekta otkrivanja intimicida iz autohtonih prehrambenih biljaka u Tajlandu, otkriveno je da etilen oksidi Cyperus rotundus, galangal i cimet imaju potencijalnu aktivnost protiv odraslih Aedesa.Egipat [36].Stoga je cilj ove studije bio procijeniti učinkovitost EO izoliranih iz ovih ljekovitih biljaka protiv komaraca Aedes.aegypti, uključujući sojeve otporne na piretroide i osjetljive.Također je analiziran sinergistički učinak binarnih mješavina etilen oksida i sintetskih piretroida s dobrom učinkovitošću kod odraslih kako bi se smanjila uporaba tradicionalnih insekticida i povećala otpornost na vektore komaraca, posebno protiv Aedesa.Aedes aegypti.Ovaj članak opisuje kemijsku karakterizaciju učinkovitih eteričnih ulja i njihov potencijal da pojačaju toksičnost sintetičkog permetrina protiv komaraca Aedes.aegypti u sojevima osjetljivim na piretroid (MCM-S) i rezistentnim sojevima (PMD-R).
Rizomi C. rotundus i A. galanga i kora C. verum (Slika 1) korišteni za ekstrakciju eteričnog ulja kupljeni su od dobavljača biljnih lijekova u provinciji Chiang Mai, Tajland.Znanstvena identifikacija ovih biljaka postignuta je kroz konzultacije s g. Jamesom Franklinom Maxwellom, herbarskim botaničarem, Odsjek za biologiju, Fakultet znanosti, Sveučilište Chiang Mai (CMU), provincija Chiang Mai, Tajland, i znanstvenik Wannari Charoensap;na Odsjeku za farmaciju, Farmaceutski fakultet, Sveučilište Carnegie Mellon, gđa. Vaučer uzorci svake biljke pohranjuju se na Odjelu za parazitologiju Medicinskog fakulteta Sveučilišta Carnegie Mellon za buduću upotrebu.
Uzorci biljaka sušeni su pojedinačno u sjeni 3-5 dana na otvorenom prostoru s aktivnom ventilacijom i temperaturom okoline od približno 30 ± 5 °C kako bi se uklonio sadržaj vlage prije ekstrakcije prirodnih eteričnih ulja (EO).Ukupno 250 g svakog suhog biljnog materijala mehanički je samljeveno u grubi prah i iskorišteno za izolaciju eteričnih ulja (EO) destilacijom vodenom parom.Aparatura za destilaciju sastojala se od električnog grijaćeg plašta, tikvice s okruglim dnom od 3000 mL, ekstrakcijske kolone, kondenzatora i Cool ace uređaja (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan) .Dodajte 1600 ml destilirane vode i 10-15 staklenih kuglica u tikvicu i zatim zagrijte na približno 100°C pomoću električnog grijača najmanje 3 sata dok destilacija ne završi i dok se više ne proizvodi EO.EO sloj je odvojen od vodene faze pomoću lijevka za odjeljivanje, osušen preko bezvodnog natrijevog sulfata (Na2SO4) i pohranjen u zatvorenoj smeđoj boci na 4°C do ispitivanja kemijskog sastava i aktivnosti odraslih.
Kemijski sastav eteričnih ulja proveden je istovremeno s biološkim testom za adultnu tvar.Kvalitativna analiza provedena je korištenjem GC-MS sustava koji se sastoji od plinskog kromatografa Hewlett-Packard (Wilmington, CA, SAD) 7890A opremljenog jednostrukim kvadrupolnim masovno selektivnim detektorom (Agilent Technologies, Wilmington, CA, SAD) i MSD 5975C (EI ).(Agilent Technologies).
Kromatografska kolona – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × debljina filma 0,25 µm).Ukupno vrijeme rada GC-MS bilo je 20 minuta.Uvjeti analize su da temperature injektora i prijenosnog voda budu 250 odnosno 280 °C;temperatura peći je postavljena da se povećava od 50°C do 250°C brzinom od 10°C/min, plin nosač je helij;brzina protoka 1,0 ml/min;volumen injekcije je 0,2 µL (1/10% volumena u CH2Cl2, omjer dijeljenja 100:1);Elektronski ionizacijski sustav s ionizacijskom energijom od 70 eV koristi se za GC-MS detekciju.Raspon prikupljanja je 50–550 jedinica atomske mase (amu), a brzina skeniranja je 2,91 skeniranja u sekundi.Relativni postoci komponenti izraženi su kao postoci normalizirani prema površini vrha.Identifikacija EO sastojaka temelji se na njihovom retencijskom indeksu (RI).RI je izračunat korištenjem jednadžbe Van den Doola i Kratza [37] za seriju n-alkana (C8-C40) i uspoređen s indeksima zadržavanja iz literature [38] i baza podataka knjižnice (NIST 2008 i Wiley 8NO8).Identitet prikazanih spojeva, poput strukture i molekulske formule, potvrđen je usporedbom s dostupnim autentičnim uzorcima.
Analitički standardi za sintetski permetrin i piperonil butoksid (PBO, pozitivna kontrola u studijama sinergije) nabavljeni su od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD).Kompleti za testiranje odraslih Svjetske zdravstvene organizacije (WHO) i dijagnostičke doze papira impregniranog permetrinom (0,75%) komercijalno su kupljeni od WHO Centra za kontrolu vektora u Penangu, Malezija.Sve druge korištene kemikalije i reagensi bili su analitičke kvalitete i kupljeni su od lokalnih institucija u provinciji Chiang Mai, Tajland.
Komarci korišteni kao testni organizmi u biološkom ispitivanju odraslih bili su slobodno pareni laboratorijski komarci Aedes.aegypti, uključujući osjetljivi soj Muang Chiang Mai (MCM-S) i otporni soj Pang Mai Dang (PMD-R).Soj MCM-S dobiven je iz lokalnih uzoraka prikupljenih u području Muang Chiang Mai, provincija Chiang Mai, Tajland, i čuva se u entomološkoj sobi Odjela za parazitologiju Medicinskog fakulteta CMU od 1995. [39].Soj PMD-R, za koji je utvrđeno da je otporan na permetrin, izoliran je iz terenskih komaraca izvorno sakupljenih iz Ban Pang Mai Danga, okruga Mae Tang, provincije Chiang Mai, Tajland, i održava se u istom institutu od 1997. [40]. ].PMD-R sojevi su uzgajani pod selektivnim pritiskom kako bi se održale razine rezistencije povremenim izlaganjem 0,75% permetrinu korištenjem pribora za detekciju WHO-a s nekim modifikacijama [41].Svaki soj Ae.Aedes aegypti je kolonizirana pojedinačno u laboratoriju bez patogena na 25 ± 2 °C i 80 ± 10% relativne vlažnosti i 14:10 h svjetlo/tama fotoperiod.Približno 200 ličinki držano je u plastičnim posudama (33 cm dugim, 28 cm širokim i 9 cm visokim) napunjenim vodom iz slavine u gustoći od 150-200 ličinki po posudi i hranjene su dva puta dnevno steriliziranim keksima za pse.Odrasli crvi držani su u vlažnim kavezima i kontinuirano hranjeni s 10% vodenom otopinom saharoze i 10% otopinom multivitaminskog sirupa.Ženke komaraca redovito sišu krv kako bi položile jaja.Ženke stare dva do pet dana koje nisu hranjene krvlju mogu se kontinuirano koristiti u eksperimentalnim biološkim testovima za odrasle.
Biotest doza-mortalitet odgovor EO proveden je na odraslim ženkama Aedes komaraca.aegypti, MCM-S i PMD-R koristeći topikalnu metodu modificiranu prema standardnom protokolu Svjetske zdravstvene organizacije za testiranje osjetljivosti [42].EO iz svake biljke je serijski razrijeđen prikladnim otapalom (npr. etanolom ili acetonom) da se dobije postupna serija od 4-6 koncentracija.Nakon anestezije ugljičnim dioksidom (CO2) komarci su izvagani pojedinačno.Anestezirani komarci su zatim držani nepomično na suhom filter papiru na prilagođenoj hladnoj ploči pod stereomikroskopom kako bi se spriječilo ponovno aktiviranje tijekom postupka.Za svaki tretman, 0,1 μl otopine EO primijenjeno je na gornji pronotum ženke pomoću Hamilton ručnog mikrodozatora (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, SAD).Dvadeset pet ženki tretirano je sa svakom koncentracijom, sa smrtnošću u rasponu od 10% do 95% za najmanje 4 različite koncentracije.Kao kontrola poslužili su komarci tretirani otapalom.Kako biste spriječili kontaminaciju ispitnih uzoraka, zamijenite filter papir novim filter papirom za svaki testirani EO.Doze korištene u ovim biološkim testovima izražene su u mikrogramima EO po miligramu žive ženske tjelesne težine.Aktivnost PBO kod odraslih također je procijenjena na sličan način kao EO, s PBO korištenim kao pozitivna kontrola u sinergističkim eksperimentima.Tretirani komarci u svim skupinama stavljeni su u plastične čaše i davali su im 10% saharoze plus 10% multivitaminskog sirupa.Svi biološki testovi izvedeni su na 25 ± 2 °C i 80 ± 10% relativne vlažnosti i ponovljeni četiri puta s kontrolama.Smrtnost tijekom 24-satnog razdoblja uzgoja provjerena je i potvrđena nedostatkom odgovora komarca na mehaničku stimulaciju, a zatim zabilježena na temelju prosjeka četiri ponavljanja.Eksperimentalni tretmani ponovljeni su četiri puta za svaki testni uzorak koristeći različite serije komaraca.Rezultati su sažeti i korišteni za izračun postotka mortaliteta, koji je korišten za određivanje 24-satne letalne doze probit analizom.
Sinergistički anticidni učinak EO i permetrina procijenjen je pomoću postupka analize lokalne toksičnosti [42] kao što je prethodno opisano.Koristite aceton ili etanol kao otapalo za pripremu permetrina u željenoj koncentraciji, kao i binarnu smjesu EO i permetrina (EO-permetrin: permetrin pomiješan s EO u koncentraciji LD25).Kompleti za testiranje (permetrin i EO-permetrin) procijenjeni su protiv MCM-S i PMD-R sojeva Ae.Aedes aegypti.Svaka od 25 ženki komaraca dobila je četiri doze permetrina kako bi se testirala njegova učinkovitost u ubijanju odraslih jedinki, pri čemu je svaki tretman ponovljen četiri puta.Kako bi se identificirali kandidati za sinergiste EO, 4 do 6 doza EO-permetrina primijenjeno je na svaku od 25 ženki komaraca, sa svakom primjenom ponovljenom četiri puta.Tretman PBO-permetrinom (permetrin pomiješan s LD25 koncentracijom PBO) također je služio kao pozitivna kontrola.Doze koje se koriste u ovim biološkim testovima izražene su u nanogramima ispitnog uzorka po miligramu žive ženske tjelesne težine.Četiri eksperimentalne procjene za svaki soj komaraca provedene su na pojedinačno uzgojenim serijama, a podaci o smrtnosti su skupljeni i analizirani korištenjem Probita kako bi se odredila 24-satna smrtonosna doza.
Stopa mortaliteta prilagođena je Abbottovom formulom [43].Prilagođeni podaci analizirani su Probit regresijskom analizom korištenjem računalnog statističkog programa SPSS (verzija 19.0).Letalne vrijednosti od 25%, 50%, 90%, 95% i 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 i LD99, respektivno) izračunate su korištenjem odgovarajućih intervala pouzdanosti od 95% (95% CI).Mjerenja značajnosti i razlika između ispitnih uzoraka procijenjena su pomoću hi-kvadrat testa ili Mann-Whitney U testa unutar svakog biološkog testa.Rezultati su smatrani statistički značajnim kod P< 0,05.Koeficijent otpora (RR) procjenjuje se na razini LD50 pomoću sljedeće formule [12]:
RR > 1 označava otpor, a RR ≤ 1 označava osjetljivost.Vrijednost omjera sinergije (SR) svakog kandidata za sinergist izračunava se na sljedeći način [34, 35, 44]:
Ovaj faktor dijeli rezultate u tri kategorije: smatra se da vrijednost SR od 1±0,05 nema vidljivog učinka, vrijednost SR od >1,05 smatra se da ima sinergistički učinak, a vrijednost SR od A svijetložutog tekućeg ulja može se dobiva se destilacijom vodenom parom rizoma C. rotundus i A. galanga i kore C. verum.Prinosi izračunati na suhu težinu bili su 0,15%, 0,27% (w/w) i 0,54% (v/v).w) odnosno (tablica 1).GC-MS studija kemijskog sastava ulja C. rotundus, A. galanga i C. verum pokazala je prisutnost 19, 17 i 21 spoja, koji su činili 80,22, 86,75 odnosno 97,24% svih komponenti (Tablica 2. ).Uljni spojevi rizoma C. lucidum uglavnom se sastoje od ciperonena (14,04%), zatim karalena (9,57%), α-kapselana (7,97%) i α-kapselana (7,53%).Glavna kemijska komponenta ulja rizoma galangala je β-bisabolen (18,27%), zatim α-bergamoten (16,28%), 1,8-cineol (10,17%) i piperonol (10,09%).Dok je cinamaldehid (64,66%) identificiran kao glavna komponenta ulja kore C. verum, cimetni acetat (6,61%), α-kopaen (5,83%) i 3-fenilpropionaldehid (4,09%) smatrani su sporednim sastojcima.Kemijske strukture ciperna, β-bisabolena i cinamaldehida glavni su spojevi C. rotundus, A. galanga i C. verum, kao što je prikazano na slici 2.
Rezultati iz tri OO procijenili su aktivnost odraslih osoba protiv komaraca Aedes.aegypti prikazani su u Tablici 3. Utvrđeno je da svi EO imaju smrtonosne učinke na MCM-S Aedes komarce pri različitim vrstama i dozama.Aedes aegypti.Najučinkovitiji EO je C. verum, a slijede ga A. galanga i C. rotundus s LD50 vrijednostima od 3,30, 7,97 i 10,05 μg/mg MCM-S ženke, nešto više od 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) i 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R u žena.To odgovara PBO-u koji ima nešto veći učinak kod odraslih na PMD-R od soja MSM-S, s vrijednostima LD50 od 4,79 odnosno 6,30 μg/mg za žene (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057) .).Može se izračunati da su vrijednosti LD50 za C. verum, A. galanga, C. rotundus i PBO u odnosu na PMD-R približno 0,98, 0,99, 0,95 i 0,76 puta manje od onih u odnosu na MCM-S.Dakle, ovo ukazuje da je osjetljivost na PBO i EO relativno slična između dva soja Aedes.Iako je PMD-R bio osjetljiviji od MCM-S, osjetljivost Aedes aegypti nije bila značajna.Nasuprot tome, dva soja Aedes uvelike su se razlikovala u svojoj osjetljivosti na permetrin.aegypti (Tablica 4).PMD-R je pokazao značajnu otpornost na permetrin (vrijednost LD50 = 0,44 ng/mg u žena) s višom vrijednošću LD50 od 3,70 u usporedbi s MCM-S (vrijednost LD50 = 0,44 ng/mg u žena) ng/mg u žena (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Iako je PMD-R mnogo manje osjetljiv na permetrin od MCM-S, njegova osjetljivost na PBO i ulja C. verum, A. galanga i C. rotundus nešto je veća od MCM-S.
Kao što je primijećeno u biološkom ispitivanju kombinacije EO-permetrin na odrasloj populaciji, binarne mješavine permetrina i EO (LD25) pokazale su ili sinergiju (SR vrijednost > 1,05) ili nikakav učinak (SR vrijednost = 1 ± 0,05).Složeni učinci smjese EO-permetrin za odrasle na eksperimentalne albino komarce.Sojevi Aedes aegypti MCM-S i PMD-R prikazani su u tablici 4 i na slici 3. Utvrđeno je da dodavanje ulja C. verum malo smanjuje LD50 permetrina u odnosu na MCM-S i blago povećava LD50 u odnosu na PMD-R na 0,44– 0,42 ng/mg u žena odnosno od 3,70 do 3,85 ng/mg u žena.Nasuprot tome, dodatak ulja C. rotundus i A. galanga značajno je smanjio LD50 permetrina na MCM-S s 0,44 na 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i na 0,11 (U = 0)., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg žena.Na temelju LD50 vrijednosti MCM-S, SR vrijednosti smjese EO-permetrin nakon dodatka ulja C. rotundus i A. galanga bile su 6,28 odnosno 4,00.U skladu s tim, LD50 permetrina u odnosu na PMD-R značajno se smanjio s 3,70 na 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i na 0,003 s dodatkom ulja C. rotundus i A. galanga (U = 0 ) ., Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg žena.Vrijednost SR permetrina u kombinaciji s C. rotundus protiv PMD-R bila je 8,81, dok je vrijednost SR mješavine galangal-permetrin bila 1233,33.U odnosu na MCM-S, vrijednost LD50 PBO pozitivne kontrole smanjila se s 0,44 na 0,26 ng/mg (ženke) i s 3,70 ng/mg (ženke) na 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) i PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Vrijednosti SR mješavine PBO-permetrina za sojeve MCM-S i PMD-R bile su 1,69 odnosno 5,69.Ovi rezultati pokazuju da ulja C. rotundus i A. galanga te PBO povećavaju toksičnost permetrina u većoj mjeri nego ulje C. verum za sojeve MCM-S i PMD-R.
Adultna aktivnost (LD50) EO, PBO, permetrina (PE) i njihovih kombinacija protiv sojeva Aedes komaraca osjetljivih na piretroide (MCM-S) i otpornih (PMD-R).Aedes aegypti
[45].Sintetski piretroidi koriste se diljem svijeta za suzbijanje gotovo svih člankonožaca od poljoprivrednog i medicinskog značaja.Međutim, zbog štetnih posljedica uporabe sintetskih insekticida, posebice u smislu razvoja i široke otpornosti komaraca, kao i dugotrajnog utjecaja na zdravlje i okoliš, hitno je potrebno smanjiti uporabu tradicionalnih sintetskih insekticida i razviti alternative [35, 46, 47].Osim zaštite okoliša i zdravlja ljudi, prednosti botaničkih insekticida uključuju visoku selektivnost, globalnu dostupnost te jednostavnost proizvodnje i uporabe, što ih čini privlačnijim za suzbijanje komaraca [32, 48, 49].Ovo je istraživanje, uz razjašnjavanje kemijskih karakteristika učinkovitih eteričnih ulja putem GC-MS analize, također procijenilo snagu eteričnih ulja za odrasle i njihovu sposobnost da pojačaju toksičnost sintetskog permetrina.aegypti u sojevima osjetljivim na piretroid (MCM-S) i rezistentnim sojevima (PMD-R).
GC-MS karakterizacija pokazala je da su ciper (14,04%), β-bisabolen (18,27%) i cinamaldehid (64,66%) glavne komponente ulja C. rotundus, A. galanga i C. verum.Te su kemikalije pokazale različite biološke aktivnosti.Ahn i sur.[50] izvijestili su da 6-acetoksiciperen, izoliran iz rizoma C. rotundus, djeluje kao antitumorski spoj i može inducirati apoptozu ovisnu o kaspazi u stanicama raka jajnika.β-Bisabolen, ekstrahiran iz eteričnog ulja stabla smirne, pokazuje specifičnu citotoksičnost protiv stanica tumora dojke kod ljudi i miševa i in vitro i in vivo [51].Cinamaldehid, dobiven iz prirodnih ekstrakata ili sintetiziran u laboratoriju, pokazao je insekticidno, antibakterijsko, antifungalno, protuupalno, imunomodulatorno, antikancerogeno i antiangiogeno djelovanje [52].
Rezultati biološke analize aktivnosti odraslih osoba ovisne o dozi pokazali su dobar potencijal testiranih EO i pokazali da sojevi komaraca Aedes MCM-S i PMD-R imaju sličnu osjetljivost na EO i PBO.Aedes aegypti.Usporedba učinkovitosti EO i permetrina pokazala je da potonji ima jači alercidni učinak: vrijednosti LD50 su 0,44 i 3,70 ng/mg kod ženki za sojeve MCM-S i PMD-R, respektivno.Ove nalaze podupiru mnoga istraživanja koja pokazuju da su prirodni pesticidi, posebice proizvodi biljnog podrijetla, općenito manje učinkoviti od sintetičkih tvari [31, 34, 35, 53, 54].To može biti zato što je prvi složena kombinacija aktivnih ili neaktivnih sastojaka, dok je drugi pročišćeni pojedinačni aktivni spoj.Međutim, raznolikost i složenost prirodnih aktivnih sastojaka s različitim mehanizmima djelovanja mogu pojačati biološku aktivnost ili spriječiti razvoj otpornosti u populaciji domaćina [55, 56, 57].Mnogi su istraživači izvijestili o potencijalu C. verum, A. galanga i C. rotundus protiv komaraca i njihovih komponenti kao što su β-bisabolen, cinamaldehid i 1,8-cineol [22, 36, 58, 59, 60, 61, 62,63,64].Međutim, pregled literature otkrio je da nije bilo prethodnih izvješća o njegovom sinergističkom učinku s permetrinom ili drugim sintetskim insekticidima protiv Aedes komaraca.Aedes aegypti.
U ovoj studiji uočene su značajne razlike u osjetljivosti na permetrin između dva soja Aedes.Aedes aegypti.MCM-S je osjetljiv na permetrin, dok je PMD-R mnogo manje osjetljiv na njega, sa stopom otpornosti od 8,41.U usporedbi s osjetljivošću MCM-S, PMD-R je manje osjetljiv na permetrin, ali više osjetljiv na EO, što daje osnovu za daljnja istraživanja usmjerena na povećanje učinkovitosti permetrina kombiniranjem s EO.Biotest na temelju sinergističke kombinacije za učinke odraslih pokazao je da binarne mješavine EO i permetrina smanjuju ili povećavaju smrtnost odraslih Aedesa.Aedes aegypti.Dodatak C. verum ulja blago je smanjio LD50 permetrina u odnosu na MCM-S, ali je neznatno povećao LD50 u odnosu na PMD-R sa SR vrijednostima od 1,05 odnosno 0,96.Ovo ukazuje da ulje C. verum nema sinergistički ili antagonistički učinak na permetrin kada se testira na MCM-S i PMD-R.Nasuprot tome, ulja C. rotundus i A. galanga pokazala su značajan sinergistički učinak značajno smanjujući LD50 vrijednosti permetrina na MCM-S ili PMD-R.Kada je permetrin kombiniran s EO C. rotundus i A. galanga, SR vrijednosti mješavine EO-permetrin za MCM-S bile su 6,28 odnosno 4,00.Dodatno, kada je permetrin procijenjen u odnosu na PMD-R u kombinaciji s C. rotundus (SR = 8,81) ili A. galanga (SR = 1233,33), SR vrijednosti su značajno porasle.Vrijedno je napomenuti da su i C. rotundus i A. galanga pojačali toksičnost permetrina protiv PMD-R Ae.aegypti značajno.Slično tome, utvrđeno je da PBO povećava toksičnost permetrina sa SR vrijednostima od 1,69 i 5,69 za sojeve MCM-S i PMD-R, redom.Budući da su C. rotundus i A. galanga imale najviše SR vrijednosti, smatralo se da su najbolji sinergisti u povećanju toksičnosti permetrina na MCM-S odnosno PMD-R.
Nekoliko ranijih studija izvijestilo je o sinergističkom učinku kombinacija sintetskih insekticida i biljnih ekstrakata protiv različitih vrsta komaraca.Larvicidni biotest protiv Anopheles Stephensija koji su proučavali Kalayanasundaram i Das [65] pokazao je da je fention, organofosfat širokog spektra, povezan s Cleodendron inerme, Pedalium murax i Parthenium hysterophorus.Uočena je značajna sinergija između ekstrakata sa sinergističkim učinkom (SF) od 1,31., 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 odnosno 2,23.U larvicidnom ispitivanju 15 vrsta mangrova, pokazalo se da je petrolej eter ekstrakt korijena mangrove najučinkovitiji protiv Culex quinquefasciatus s vrijednošću LC50 od 25,7 mg/L [66].Za sinergistički učinak ovog ekstrakta i botaničkog insekticida buhač također je zabilježeno smanjenje LC50 buhača protiv ličinki C. quinquefasciatus s 0,132 mg/L na 0,107 mg/L, osim toga, u ovoj studiji korišten je SF izračun od 1,23.34,35,44].Procijenjena je kombinirana učinkovitost ekstrakta korijena Solanum citrona i nekoliko sintetskih insekticida (npr. fentiona, cipermetrina (sintetski piretroid) i timethfosa (organofosforni larvicid)) protiv komaraca Anopheles.Stephensi [54] i C. quinquefasciatus [34].Kombinirana primjena cipermetrina i ekstrakta petrolej etera žutog voća pokazala je sinergistički učinak na cipermetrin u svim omjerima.Najučinkovitiji omjer bila je binarna kombinacija 1:1 s vrijednostima LC50 i SF od 0,0054 ppm odnosno 6,83 u odnosu na An.Stephen West[54].Dok je 1:1 binarna smjesa S. xanthocarpum i temefosa bila antagonistička (SF = 0,6406), kombinacija S. xanthocarpum-fention (1:1) pokazala je sinergijsko djelovanje protiv C. quinquefasciatus sa SF od 1,3125 [34]].Tong i Blomquist [35] proučavali su učinke biljnog etilen oksida na toksičnost karbarila (karbamata širokog spektra) i permetrina na Aedes komarce.Aedes aegypti.Rezultati su pokazali da etilen oksid iz agara, crnog papra, smreke, helikrizuma, sandalovine i sezama povećava toksičnost karbarila za Aedes komarce.aegypti larvae SR vrijednosti variraju od 1,0 do 7,0.Nasuprot tome, nijedan od EO nije bio toksičan za odrasle komarce Aedes.U ovoj fazi nisu prijavljeni sinergistički učinci za kombinaciju Aedes aegypti i EO-karbarila.PBO je korišten kao pozitivna kontrola za povećanje toksičnosti karbarila protiv Aedes komaraca.Vrijednosti SR ličinki Aedes aegypti i odraslih jedinki su 4,9-9,5 odnosno 2,3.Samo su binarne smjese permetrina i EO ili PBO testirane na larvicidnu aktivnost.Mješavina EO-permetrin imala je antagonistički učinak, dok je smjesa PBO-permetrin imala sinergistički učinak protiv Aedes komaraca.Larve Aedes aegypti.Međutim, eksperimenti odgovora na dozu i procjena SR za mješavine PBO-permetrina još nisu provedeni.Iako je postignuto malo rezultata u pogledu sinergističkih učinaka fitosintetskih kombinacija protiv vektora komaraca, ovi podaci podupiru postojeće rezultate, koji otvaraju mogućnost dodavanja sinergista ne samo za smanjenje primijenjene doze, već i za povećanje učinka ubijanja.Učinkovitost insekata.Osim toga, rezultati ove studije po prvi su put pokazali da ulja C. rotundus i A. galanga sinergistički pokazuju značajno veću učinkovitost protiv sojeva komaraca Aedes koji su osjetljivi na piretroide i otporni na piretroide u usporedbi s PBO-om u kombinaciji s toksičnošću permetrina.Aedes aegypti.Međutim, neočekivani rezultati sinergističke analize pokazali su da je ulje C. verum imalo najveće djelovanje protiv odraslih osoba protiv oba soja Aedes.Iznenađujuće, toksični učinak permetrina na Aedes aegypti nije bio zadovoljavajući.Varijacije u toksičnim učincima i sinergijskim učincima mogu biti djelomično posljedica izloženosti različitim vrstama i razinama bioaktivnih komponenti u tim uljima.
Unatoč naporima da se shvati kako poboljšati učinkovitost, sinergijski mehanizmi ostaju nejasni.Mogući razlozi za različitu učinkovitost i sinergistički potencijal mogu uključivati razlike u kemijskom sastavu testiranih proizvoda i razlike u osjetljivosti komaraca povezane sa statusom otpornosti i razvojem.Postoje razlike između glavnih i sporednih komponenti etilen oksida testiranih u ovoj studiji, a pokazalo se da neki od ovih spojeva imaju repelentne i toksične učinke protiv raznih štetnika i vektora bolesti [61,62,64,67,68].Međutim, glavni spojevi karakterizirani u uljima C. rotundus, A. galanga i C. verum, kao što su ciperin, β-bisabolen i cinamaldehid, nisu testirani u ovom radu na njihovu antiadultnu i sinergističku aktivnost protiv Ae.Aedes aegypti.Stoga su potrebne buduće studije kako bi se izolirali aktivni sastojci prisutni u svakom eteričnom ulju i razjasnila njihova insekticidna učinkovitost i sinergističke interakcije protiv ovog vektora komaraca.Općenito, insekticidno djelovanje ovisi o djelovanju i reakciji između otrova i tkiva kukca, što se može pojednostaviti i podijeliti u tri faze: prodiranje u kožu tijela kukca i membrane ciljnih organa, aktivacija (= interakcija s metom) i detoksikacija.otrovne tvari [57, 69].Stoga, sinergizam insekticida koji rezultira povećanom učinkovitošću kombinacija toksičnih tvari zahtijeva barem jednu od ovih kategorija, kao što je povećano prodiranje, veća aktivacija akumuliranih spojeva ili manje smanjena detoksikacija aktivnog sastojka pesticida.Na primjer, energetska tolerancija odgađa prodiranje kutikule kroz zadebljanu kutikulu i biokemijsku otpornost, kao što je poboljšani metabolizam insekticida uočen u nekih otpornih sojeva insekata [70, 71].Značajna učinkovitost EO u povećanju toksičnosti permetrina, posebno protiv PMD-R, može ukazivati na rješenje problema otpornosti na insekticide interakcijom s mehanizmima otpornosti [57, 69, 70, 71].Tong i Blomquist [35] poduprli su rezultate ove studije demonstrirajući sinergijsku interakciju između EO i sintetičkih pesticida.aegypti, postoje dokazi o inhibitornoj aktivnosti protiv detoksikacijskih enzima, uključujući citokrom P450 monooksigenaze i karboksilesteraze, koji su usko povezani s razvojem otpornosti na tradicionalne pesticide.Za PBO se ne kaže samo da je metabolički inhibitor citokrom P450 monooksigenaze, već također poboljšava prodor insekticida, što je dokazano njegovom upotrebom kao pozitivne kontrole u sinergističkim studijama [35, 72].Zanimljivo je da je 1,8-cineol, jedna od važnih komponenti pronađenih u ulju galangala, poznat po svojim toksičnim učincima na vrste insekata [22, 63, 73] i objavljeno je da ima sinergističke učinke u nekoliko područja istraživanja biološke aktivnosti [ 74]..,75,76,77].Osim toga, 1,8-cineol u kombinaciji s različitim lijekovima uključujući kurkumin [78], 5-fluorouracil [79], mefenaminska kiselina [80] i zidovudin [81] također ima učinak promicanja prodiranja.in vitro.Stoga, moguća uloga 1,8-cineola u sinergističkom insekticidnom djelovanju nije samo kao aktivni sastojak, već i kao pojačivač penetracije.Zbog većeg sinergizma s permetrinom, posebno protiv PMD-R, sinergistički učinci ulja galangala i ulja trihozanta opaženi u ovoj studiji mogu biti posljedica interakcija s mehanizmima rezistencije, tj. povećane propusnosti za klor.Piretroidi povećavaju aktivaciju nakupljenih spojeva i inhibiraju detoksifikacijske enzime kao što su citokrom P450 monooksigenaze i karboksilesteraze.Međutim, ovi aspekti zahtijevaju daljnja istraživanja kako bi se razjasnila specifična uloga EO i njegovih izoliranih spojeva (samih ili u kombinaciji) u sinergističkim mehanizmima.
Godine 1977. zabilježene su sve veće razine rezistencije na permetrin u glavnim populacijama vektora u Tajlandu, a tijekom sljedećih desetljeća upotreba permetrina uvelike je zamijenjena drugim piretroidnim kemikalijama, posebno onima koje je zamijenio deltametrin [82].Međutim, otpornost vektora na deltametrin i druge klase insekticida iznimno je česta u cijeloj zemlji zbog pretjerane i uporne uporabe [14, 17, 83, 84, 85, 86].Za borbu protiv ovog problema preporučuje se rotirati ili ponovno koristiti odbačene pesticide koji su prethodno bili učinkoviti i manje toksični za sisavce, poput permetrina.Trenutačno, iako je upotreba permetrina smanjena u nedavnim državnim programima kontrole komaraca, otpornost na permetrin još uvijek se može naći u populaciji komaraca.To može biti zbog izloženosti komaraca komercijalnim kućnim proizvodima za kontrolu štetočina, koji se uglavnom sastoje od permetrina i drugih piretroida [14, 17].Stoga uspješna prenamjena permetrina zahtijeva razvoj i provedbu strategija za smanjenje otpornosti vektora.Iako niti jedno od eteričnih ulja pojedinačno testiranih u ovoj studiji nije bilo tako učinkovito kao permetrin, zajednički rad s permetrinom rezultirao je impresivnim sinergističkim učincima.Ovo je obećavajući pokazatelj da interakcija EO s mehanizmima rezistencije rezultira učinkovitijom kombinacijom permetrina i EO od insekticida ili samog EO, osobito protiv PMD-R Ae.Aedes aegypti.Prednosti sinergističkih mješavina u povećanju učinkovitosti, unatoč upotrebi nižih doza za kontrolu vektora, mogu dovesti do poboljšanog upravljanja otpornošću i smanjenih troškova [33, 87].Iz ovih rezultata, drago je primijetiti da su EO A. galanga i C. rotundus bili značajno učinkovitiji od PBO u sinergiziranju toksičnosti permetrina u MCM-S i PMD-R sojevima te su potencijalna alternativa tradicionalnim ergogenim pomagalima.
Odabrani EO imali su značajne sinergističke učinke u povećanju toksičnosti odraslih osoba protiv PMD-R Ae.aegypti, posebno galangalovo ulje, ima SR vrijednost do 1233,33, što ukazuje da EO ima široku perspektivu kao sinergist u poboljšanju učinkovitosti permetrina.To bi moglo potaknuti upotrebu novog aktivnog prirodnog proizvoda, što bi zajedno moglo povećati upotrebu visoko učinkovitih proizvoda za kontrolu komaraca.Također otkriva potencijal etilen oksida kao alternativnog sinergista za učinkovito poboljšanje starijih ili tradicionalnih insekticida za rješavanje postojećih problema otpornosti u populaciji komaraca.Korištenje lako dostupnih biljaka u programima kontrole komaraca ne samo da smanjuje ovisnost o uvezenim i skupim materijalima, već također potiče lokalne napore za jačanje sustava javnog zdravstva.
Ovi rezultati jasno pokazuju značajan sinergistički učinak koji proizvodi kombinacija etilen oksida i permetrina.Rezultati naglašavaju potencijal etilen oksida kao biljnog sinergista u kontroli komaraca, povećavajući učinkovitost permetrina protiv komaraca, posebno kod otpornih populacija.Budući razvoj i istraživanja zahtijevat će sinergističku bioanalizu ulja galangala i alpinije i njihovih izoliranih spojeva, kombinacije insekticida prirodnog ili sintetskog podrijetla protiv više vrsta i stadija komaraca, te ispitivanje toksičnosti protiv neciljanih organizama.Praktična uporaba etilen oksida kao održivog alternativnog sinergista.
Svjetska zdravstvena organizacija.Globalna strategija za prevenciju i kontrolu denge 2012.–2020.Ženeva: Svjetska zdravstvena organizacija, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al.Zika virus: povijest, pojava, biologija i mogućnosti kontrole.Antivirusna istraživanja.2016;130:69-80.
Svjetska zdravstvena organizacija.Podaci o denga groznici.2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Datum pristupa: 20. siječnja 2017
Odjel za javno zdravstvo.Trenutno stanje slučajeva denga groznice i denga hemoragične groznice u Tajlandu.2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Datum pristupa: 6. siječnja 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 godina prevencije denga groznice i kontrole vektora u Singapuru.Iznenadna zarazna bolest.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identificirati izazove i predložiti rješenja za kontrolu vektora virusa Aedes aegypti.PLOS Medicina.2008;5:362-6.
Centar za kontrolu i prevenciju bolesti.Denga groznica, entomologija i ekologija.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Datum pristupa: 6. siječnja 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Usporedba larvicidne aktivnosti lišća, kore, stabljika i korijena Jatropa curcas (Euphorbiaceae) protiv vektora malarije Anopheles gambiae.SZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Karakteristike staništa Anopheles ličinki u malarijskim područjima programa iskorjenjivanja malarije u jugoistočnom Iranu.Azija Pacifik J Trop Biomed.2014;4(Dodatak 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Pregled pristupa kontroli vektora, prevenciji i kontroli izbijanja virusa Zapadnog Nila i izazovima s kojima se Europa suočava.Vektor parazita.2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Odabir i molekularni mehanizmi otpornosti na cipermetrin u crvenih gusjenica (Amsacta albistriga Walker).Biokemijska fiziologija štetnika.2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratorijska studija rezistencije na permetrin i unakrsne rezistencije Culex quinquefasciatus na druge insekticide.Istraživački centar Palastor.2015;114:2553-60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Kemija pesticida: Dobrobit ljudi i okoliš, sv.3: Mehanizam djelovanja, metabolizam i toksikologija.New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Pregled rezistencije na insekticide i izbjegavanja ponašanja vektora ljudskih bolesti u Tajlandu.Vektor parazita.2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Trenutačni uzorci otpornosti na insekticide među vektorima komaraca u Tajlandu.Jugoistočna Azija J Trop Med Public Health.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Status malarije u Tajlandu.Jugoistočna Azija J Trop Med Public Health.2000;31:225-37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Vremenska učestalost F1534C i V1016G knockdown otpornih mutacija kod komaraca Aedes aegypti u Chiang Maiju, Tajland, i utjecaj mutacija na učinkovitost sprejeva toplinske magle koji sadrže piretroide.Aktatrop.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Otpornost na insekticide u glavnim vektorima denge Aedes albopictus i Aedes aegypti.Biokemijska fiziologija štetnika.2012;104:126-31.
Vrijeme objave: 8. srpnja 2024