Raširena uporaba sintetičkih pesticida dovela je do mnogih problema, uključujući pojavu otpornih organizama, degradaciju okoliša i štetu ljudskom zdravlju.Stoga su hitno potrebni novi mikrobiološki pesticidi koji su sigurni za ljudsko zdravlje i okoliš.U ovoj studiji, ramnolipidni biosurfaktant koji proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 korišten je za procjenu toksičnosti za ličinke komaraca (Culex quinquefasciatus) i termita (Odontotermes obesus).Rezultati su pokazali da postoji stopa smrtnosti ovisna o dozi između tretmana.Vrijednost LC50 (50% letalne koncentracije) nakon 48 sati za biosurfaktante termita i ličinki komaraca određena je metodom prilagodbe krivulje nelinearne regresije.Rezultati su pokazali da su 48-satne vrijednosti LC50 (95% interval pouzdanosti) larvicidne i antitermitne aktivnosti biosurfaktanta bile 26,49 mg/L (raspon 25,40 do 27,57) odnosno 33,43 mg/L (raspon 31,09 do 35,68).Prema patohistološkom pregledu, tretman biosurfaktantima uzrokovao je teška oštećenja tkiva organela ličinki i termita.Rezultati ove studije pokazuju da je mikrobni biosurfaktant koji proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 izvrsno i potencijalno učinkovito sredstvo za kontrolu Cx.quinquefasciatus i O. obesus.
U tropskim zemljama postoji veliki broj bolesti koje prenose komarci1.Važnost bolesti koje prenose komarci je široko rasprostranjena.Više od 400 000 ljudi umire od malarije svake godine, a neki veliki gradovi doživljavaju epidemije ozbiljnih bolesti kao što su denga, žuta groznica, chikungunya i zika.2 Bolesti koje prenose vektori povezane su s jednom od šest infekcija diljem svijeta, a komarci su najveći uzrok značajni slučajevi3 ,4.Culex, Anopheles i Aedes tri su roda komaraca koji se najčešće povezuju s prijenosom bolesti5.Prevalencija denga groznice, infekcije koju prenosi komarac Aedes aegypti, porasla je u posljednjem desetljeću i predstavlja značajnu prijetnju javnom zdravlju4,7,8.Prema podacima Svjetske zdravstvene organizacije (WHO), više od 40% svjetske populacije je u opasnosti od denga groznice, s 50-100 milijuna novih slučajeva godišnje u više od 100 zemalja9,10,11.Denga groznica postala je veliki javnozdravstveni problem jer se njezina učestalost povećala diljem svijeta12,13,14.Anopheles gambiae, općenito poznat kao afrički komarac Anopheles, najvažniji je vektor humane malarije u tropskim i suptropskim regijama15.Virus zapadnog Nila, encefalitis St. Louisa, japanski encefalitis i virusne infekcije konja i ptica prenose komarci Culex, koji se često nazivaju i kućni komarci.Osim toga, također su prijenosnici bakterijskih i parazitarnih bolesti16.U svijetu postoji više od 3000 vrsta termita, a postoje više od 150 milijuna godina17.Većina štetnika živi u tlu i hrani se drvetom i proizvodima od drva koji sadrže celulozu.Indijski termit Odontotermes obesus važan je štetnik koji uzrokuje ozbiljne štete na važnim usjevima i plantažnim stablima18.U poljoprivrednim područjima najezde termita u različitim fazama mogu uzrokovati golemu ekonomsku štetu na raznim usjevima, vrstama drveća i građevinskim materijalima.Termiti također mogu uzrokovati zdravstvene probleme19.
Pitanje otpornosti na mikroorganizme i štetočine u današnjoj farmaciji i poljoprivredi složeno je20,21.Stoga bi obje tvrtke trebale tražiti nove isplative antimikrobne lijekove i sigurne biopesticide.Sintetski pesticidi su sada dostupni i pokazalo se da su zarazni i odbijaju neciljane korisne insekte22.Posljednjih godina istraživanja biosurfaktanata su proširena zbog njihove primjene u raznim industrijama.Biosurfaktanti su vrlo korisni i vitalni u poljoprivredi, remedijaciji tla, vađenju nafte, uklanjanju bakterija i insekata te preradi hrane23,24.Biosurfaktanti ili mikrobni tenzidi su biotenzidi kemikalije koje proizvode mikroorganizmi poput bakterija, kvasaca i gljivica u obalnim staništima i područjima zagađenim naftom25,26.Kemijski dobiveni surfaktanti i biosurfaktanti dvije su vrste koje se dobivaju izravno iz prirodnog okoliša27.Različiti biosurfaktanti dobivaju se iz morskih staništa28,29.Stoga znanstvenici traže nove tehnologije za proizvodnju biosurfaktanata na bazi prirodnih bakterija30,31.Napredak u takvim istraživanjima pokazuje važnost ovih bioloških spojeva za zaštitu okoliša32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium i ovi bakterijski rodovi dobro su proučeni predstavnici23,33.
Postoje mnoge vrste biosurfaktanata sa širokim rasponom primjene34.Značajna prednost ovih spojeva je što neki od njih imaju antibakterijsko, larvicidno i insekticidno djelovanje.To znači da se mogu koristiti u poljoprivrednoj, kemijskoj, farmaceutskoj i kozmetičkoj industriji35,36,37,38.Budući da su biosurfaktanti općenito biorazgradivi i korisni za okoliš, koriste se u programima integriranog upravljanja štetočinama za zaštitu usjeva39.Tako su stečena temeljna saznanja o larvicidnom i antitermitnom djelovanju mikrobnih biosurfaktanata koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2.Ispitali smo smrtnost i histološke promjene pri izlaganju različitim koncentracijama ramnolipidnih biosurfaktanata.Osim toga, procijenili smo naširoko korišten računalni program Quantitative Structure-Activity (QSAR) Ecological Structure-Activity (ECOSAR) za određivanje akutne toksičnosti za mikroalge, dafnije i ribe.
U ovoj studiji, antitermitna aktivnost (toksičnost) pročišćenih biosurfaktanata u različitim koncentracijama u rasponu od 30 do 50 mg/ml (u intervalima od 5 mg/ml) ispitana je protiv indijskih termita, O. obesus i četvrte vrste )Evaluate.Larve stadija Cx.Larve komaraca quinquefasciatus.Koncentracije biosurfaktanta LC50 tijekom 48 sati protiv O. obesus i Cx.C. solanacearum.Ličinke komaraca identificirane su metodom prilagodbe krivulje nelinearne regresije.Rezultati su pokazali da se smrtnost termita povećava s povećanjem koncentracije biosurfaktanta.Rezultati su pokazali da biosurfaktant ima larvicidnu aktivnost (Slika 1) i antitermitnu aktivnost (Slika 2), s 48-satnim vrijednostima LC50 (95% CI) od 26,49 mg/L (25,40 do 27,57 ) i 33,43 mg/L. l (Sl. 31.09 do 35.68), odnosno (Tablica 1).U smislu akutne toksičnosti (48 sati), biosurfaktant je klasificiran kao "štetan" za testirane organizme.Biosurfaktant proizveden u ovoj studiji pokazao je izvrsnu larvicidnu aktivnost sa 100% smrtnošću unutar 24-48 sati od izlaganja.
Izračunajte vrijednost LC50 za larvicidnu aktivnost.Prilagodba krivulje nelinearne regresije (puna linija) i 95% interval pouzdanosti (osjenčano područje) za relativnu smrtnost (%).
Izračunajte vrijednost LC50 za aktivnost protiv termita.Prilagodba krivulje nelinearne regresije (puna linija) i 95% interval pouzdanosti (osjenčano područje) za relativnu smrtnost (%).
Na kraju eksperimenta pod mikroskopom su uočene morfološke promjene i anomalije.Morfološke promjene uočene su u kontrolnoj i tretiranoj skupini pri povećanju od 40x.Kao što je prikazano na slici 3, došlo je do poremećaja rasta kod većine ličinki tretiranih biosurfaktantima.Slika 3a prikazuje normalni Cx.quinquefasciatus, slika 3b prikazuje anomalni Cx.Uzrokuje pet ličinki nematoda.
Učinak subletalnih (LC50) doza biosurfaktanata na razvoj ličinki Culex quinquefasciatus.Slika svjetlosnim mikroskopom (a) normalnog Cx pri povećanju od 40x.quinquefasciatus (b) Abnormalni Cx.Uzrokuje pet ličinki nematoda.
U ovoj studiji, histološki pregled tretiranih ličinki (Slika 4) i termita (Slika 5) otkrio je nekoliko abnormalnosti, uključujući smanjenje područja abdomena i oštećenja mišića, epitelnih slojeva i kože.srednje crijevo.Histologija je otkrila mehanizam inhibitorne aktivnosti biosurfaktanta korištenog u ovoj studiji.
Histopatologija normalnih netretiranih ličinki Cx 4. stupnja.quinquefasciatus larvae (kontrola: (a,b)) i tretirana biosurfaktantom (tretman: (c,d)).Strelice označavaju tretirani crijevni epitel (epi), jezgre (n) i mišić (mu).Šipka = 50 µm.
Histopatologija normalnog neliječenog O. obesus (kontrola: (a,b)) i tretiranog biosurfaktantom (liječenje: (c,d)).Strelice označavaju crijevni epitel (epi) i mišić (mu).Šipka = 50 µm.
U ovoj studiji ECOSAR je korišten za predviđanje akutne toksičnosti ramnolipidnih biosurfaktanata za primarne proizvođače (zelene alge), primarne potrošače (vodene buhe) i sekundarne potrošače (ribe).Ovaj program koristi sofisticirane kvantitativne modele spojeva strukture i aktivnosti za procjenu toksičnosti na temelju molekularne strukture.Model koristi softver strukturne aktivnosti (SAR) za izračunavanje akutne i dugotrajne toksičnosti tvari za vodene vrste.Konkretno, tablica 2 sažima procijenjene srednje letalne koncentracije (LC50) i srednje učinkovite koncentracije (EC50) za nekoliko vrsta.Sumnja na toksičnost kategorizirana je u četiri razine pomoću Globalno usklađenog sustava klasifikacije i označavanja kemikalija (Tablica 3).
Suzbijanje vektorskih bolesti, posebice sojeva komaraca i komaraca Aedes.Egipćani, sada težak posao 40,41,42,43,44,45,46.Iako su neki kemijski dostupni pesticidi, kao što su piretroidi i organofosfati, donekle korisni, oni predstavljaju značajan rizik za ljudsko zdravlje, uključujući dijabetes, reproduktivne poremećaje, neurološke poremećaje, rak i respiratorne bolesti.Štoviše, s vremenom ti insekti mogu postati otporni na njih13,43,48.Stoga će učinkovite i ekološki prihvatljive biološke mjere kontrole postati popularnija metoda kontrole komaraca49,50.Benelli51 je predložio da bi rana kontrola vektora komaraca bila učinkovitija u urbanim područjima, ali nisu preporučili upotrebu larvicida u ruralnim područjima52.Tom i suradnici 53 također su predložili da bi suzbijanje komaraca u njihovim nezrelim stadijima bila sigurna i jednostavna strategija jer su oni osjetljiviji na agense kontrole 54 .
Proizvodnja biosurfaktanta snažnim sojem (Enterobacter cloacae SJ2) pokazala je dosljednu i obećavajuću učinkovitost.Naša prethodna studija objavila je da Enterobacter cloacae SJ2 optimizira proizvodnju biosurfaktanta pomoću fizikalno-kemijskih parametara26.Prema njihovoj studiji, optimalni uvjeti za proizvodnju biosurfaktanta pomoću potencijalnog izolata E. cloacae bili su inkubacija 36 sati, miješanje na 150 okretaja u minuti, pH 7,5, 37 °C, salinitet 1 ppt, 2% glukoze kao izvora ugljika, 1% kvasca .ekstrakt je korišten kao izvor dušika da se dobije 2,61 g/L biosurfaktanta.Osim toga, biosurfaktanti su karakterizirani pomoću TLC, FTIR i MALDI-TOF-MS.Ovo je potvrdilo da je ramnolipid biosurfaktant.Glikolipidni biosurfaktanti su najintenzivnije proučavana klasa drugih vrsta biosurfaktanata55.Sastoje se od ugljikohidratnih i lipidnih dijelova, uglavnom lanaca masnih kiselina.Među glikolipidima glavni predstavnici su ramnolipid i soforolipid56.Ramnolipidi sadrže dvije ramnozne ostatke povezane s mono- ili di-β-hidroksidekanoinskom kiselinom 57 .Upotreba ramnolipida u medicinskoj i farmaceutskoj industriji dobro je poznata 58 , uz njihovu nedavnu upotrebu kao pesticida 59 .
Interakcija biosurfaktanta s hidrofobnim područjem dišnog sifona omogućuje prolazak vode kroz stomatalnu šupljinu, čime se povećava kontakt ličinki s vodenim okolišem.Prisutnost biosurfaktanata utječe i na dušnik čija je duljina blizu površine, što ličinkama olakšava puzanje na površinu i disanje.Kao rezultat toga, površinska napetost vode se smanjuje.Budući da se ličinke ne mogu pričvrstiti na površinu vode, one padaju na dno spremnika, remeteći hidrostatski tlak, što dovodi do prekomjerne potrošnje energije i smrti utapanjem38,60.Slične rezultate je dobio Ghribi61, gdje je biosurfaktant proizveden od Bacillus subtilis pokazao larvicidnu aktivnost protiv Ephestia kuehniella.Slično, larvicidna aktivnost Cx.Das i Mukherjee23 također su procijenili učinak cikličkih lipopeptida na ličinke quinquefasciatusa.
Rezultati ove studije odnose se na larvicidnu aktivnost ramnolipidnih biosurfaktanata protiv Cx.Ubijanje komaraca quinquefasciatus u skladu je s prethodno objavljenim rezultatima.Na primjer, koriste se biosurfaktanti na bazi surfaktina koje proizvode razne bakterije iz roda Bacillus.i Pseudomonas spp.Neka rana izvješća64,65,66 izvještavaju o ubijanju ličinki lipopeptidnih biosurfaktanata iz Bacillus subtilis23.Deepali i sur.63 otkrili su da ramnolipidni biosurfaktant izoliran iz Stenotropomonas maltophilia ima snažnu larvicidnu aktivnost u koncentraciji od 10 mg/L.Silva i sur.67 izvijestili su o larvicidnoj aktivnosti ramnolipidnog biosurfaktanta protiv Ae u koncentraciji od 1 g/L.Aedes aegypti.Kanakdande i sur.68 izvijestio je da su lipopeptidni biosurfaktanti koje proizvodi Bacillus subtilis uzrokovali ukupnu smrtnost kod ličinki Culexa i termita s lipofilnom frakcijom eukaliptusa.Slično, Masendra et al.69 prijavio smrtnost mrava radnika (Cryptotermes cynocephalus Light.) od 61,7% u lipofilnim n-heksanskim i EtOAc frakcijama E. sirovog ekstrakta.
Parthipan i suradnici 70 izvijestili su o insekticidnoj uporabi lipopeptidnih biosurfaktanata koje proizvode Bacillus subtilis A1 i Pseudomonas stutzeri NA3 protiv Anopheles Stephensi, vektora parazita malarije Plasmodium.Primijetili su da su ličinke i kukuljice dulje preživjele, imale kraća razdoblja polaganja jajnih stanica, bile sterilne i imale kraći životni vijek kada su tretirane različitim koncentracijama biosurfaktanata.Opažene vrijednosti LC50 biosurfaktanta A1 B. subtilis bile su 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 i 7,99 mg/L za različita stanja ličinki (tj. ličinke I, II, III, IV i stadij kukuljice).Za usporedbu, biosurfaktanti za stadije ličinke I-IV i stadije kukuljice Pseudomonas stutzeri NA3 bili su 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 i 6,99 mg/L, respektivno.Smatra se da je odgođena fenologija preživjelih ličinki i kukuljica rezultat značajnih fizioloških i metaboličkih poremećaja uzrokovanih tretmanima insekticidima71.
Wickerhamomyces anomalus soj CCMA 0358 proizvodi biosurfaktant sa 100% larvicidnim djelovanjem protiv Aedes komaraca.aegypti 24-satni interval 38 bio je veći nego što su prijavili Silva et al.Pokazalo se da biosurfaktant proizveden od Pseudomonas aeruginosa korištenjem suncokretovog ulja kao izvora ugljika ubija 100% ličinki unutar 48 sati 67 .Abinaya i sur.72 i Pradhan i sur.73 također su pokazali larvicidne ili insekticidne učinke površinski aktivnih tvari koje proizvodi nekoliko izolata iz roda Bacillus.Prethodno objavljena studija Senthil-Nathana i sur.otkrili su da će 100% ličinki komaraca izloženih biljnim lagunama vjerojatno uginuti.74.
Procjena subletalnih učinaka insekticida na biologiju insekata ključna je za integrirane programe suzbijanja štetočina jer subletalne doze/koncentracije ne ubijaju insekte, ali mogu smanjiti populaciju insekata u budućim generacijama narušavanjem bioloških karakteristika10.Siqueira i suradnici 75 uočili su potpunu larvicidnu aktivnost (100% mortalitet) ramnolipidnog biosurfaktanta (300 mg/ml) kada su testirani u različitim koncentracijama u rasponu od 50 do 300 mg/ml.Stadij ličinke sojeva Aedes aegypti.Analizirali su učinke vremena do smrti i subletalne koncentracije na preživljavanje ličinki i aktivnost plivanja.Osim toga, primijetili su smanjenje brzine plivanja nakon 24-48 sati izlaganja subletalnim koncentracijama biosurfaktanta (npr. 50 mg/mL i 100 mg/mL).Smatra se da su otrovi koji imaju obećavajuće subletalne uloge učinkovitiji u nanošenju višestruke štete izloženim štetnicima76.
Histološka promatranja naših rezultata pokazuju da biosurfaktanti koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 značajno mijenjaju tkiva ličinki komaraca (Cx. quinquefasciatus) i termita (O. obesus).Slične anomalije uzrokovali su pripravci ulja bosiljka u An.gambiaes.s i An.arabicu opisao je Ochola77.Kamaraj et al.78 također su opisali iste morfološke abnormalnosti u An.Stephanieine ličinke bile su izložene nanočesticama zlata.Vasantha-Srinivasan i sur.79 također su izvijestili da je eterično ulje pastirske torbice ozbiljno oštetilo komore i epitelne slojeve Aedes albopictus.Aedes aegypti.Raghavendran et al izvijestili su da su ličinke komaraca tretirane s 500 mg/ml ekstrakta micelija lokalne gljive Penicillium.Ae pokazuju ozbiljna histološka oštećenja.aegypti i Cx.Stopa smrtnosti 80. Prethodno su Abinaya et al.Proučavane su ličinke četvrtog stadija An.Stephensi i Ae.aegypti pronašao je brojne histološke promjene u Aedes aegypti liječenih egzopolisaharidima B. licheniformis, uključujući cekum želuca, atrofiju mišića, oštećenje i dezorganizaciju ganglija živčane vrpce72.Prema Raghavendran i sur., nakon tretmana s ekstraktom micelija P. daleae, stanice srednjeg crijeva testiranih komaraca (ličinke 4. stupnja) pokazale su oticanje crijevnog lumena, smanjenje međustaničnog sadržaja i nuklearnu degeneraciju81.Iste histološke promjene uočene su u ličinki komaraca tretiranih ekstraktom lista ehinaceje, što ukazuje na insekticidni potencijal tretiranih spojeva50.
Korištenje softvera ECOSAR dobilo je međunarodno priznanje82.Trenutna istraživanja sugeriraju da akutna toksičnost ECOSAR biosurfaktanata za mikroalge (C. vulgaris), ribe i vodene buhe (D. magna) spada u kategoriju „toksičnosti” definiranu od strane Ujedinjenih naroda83.ECOSAR model ekotoksičnosti koristi SAR i QSAR za predviđanje akutne i dugotrajne toksičnosti tvari i često se koristi za predviđanje toksičnosti organskih zagađivača82,84.
Paraformaldehid, natrijev fosfatni pufer (pH 7,4) i sve druge kemikalije korištene u ovoj studiji kupljene su od HiMedia Laboratories, Indija.
Proizvodnja biosurfaktanta provedena je u Erlenmeyerovim tikvicama od 500 mL koje sadrže 200 mL sterilnog Bushnell Haas medija s dodatkom 1% sirove nafte kao jedinog izvora ugljika.Pretkultura Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 CFU/ml) inokulirana je i uzgajana na orbitalnoj tresilici na 37°C, 200 okretaja u minuti tijekom 7 dana.Nakon razdoblja inkubacije, biosurfaktant je ekstrahiran centrifugiranjem medija kulture na 3400 x g tijekom 20 minuta na 4 °C, a dobiveni supernatant je korišten za potrebe pretraživanja.Postupci optimizacije i karakterizacija biosurfaktanata preuzeti su iz naše prethodne studije26.
Ličinke Culex quinquefasciatus dobivene su iz Centra za napredne studije biologije mora (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (Indija).Larve su uzgajane u plastičnim posudama napunjenim deioniziranom vodom na 27 ± 2°C i fotoperiodu od 12:12 (svjetlo:tama).Ličinke komaraca hranjene su 10% otopinom glukoze.
U otvorenim i nezaštićenim septičkim jamama pronađene su ličinke Culex quinquefasciatus.Koristite standardne smjernice za klasifikaciju za identifikaciju i uzgoj ličinki u laboratoriju85.Larvicidna ispitivanja provedena su u skladu s preporukama Svjetske zdravstvene organizacije 86 .SH.Ličinke četvrtog stadija quinquefasciatusa sakupljene su u zatvorene epruvete u skupinama od 25 ml i 50 ml sa zračnim rasporom od dvije trećine njihovog kapaciteta.Biosurfaktant (0-50 mg/ml) dodan je u svaku epruvetu pojedinačno i pohranjen na 25 °C.Kontrolna epruveta koristila je samo destiliranu vodu (50 ml).Mrtvim ličinkama smatrale su se one koje nisu pokazivale znakove plivanja tijekom razdoblja inkubacije (12-48 sati) 87 .Izračunajte postotak smrtnosti ličinki pomoću jednadžbe.(1)88.
Obitelj Odontotermitidae uključuje indijskog termita Odontotermes obesus, pronađenog u trulim trupcima na Poljoprivrednom kampusu (Sveučilište Annamalai, Indija).Testirajte ovaj biosurfaktant (0-50 mg/ml) uobičajenim postupcima kako biste utvrdili je li štetan.Nakon sušenja u laminarnom protoku zraka tijekom 30 minuta, svaka traka Whatman papira obložena je biosurfaktantom u koncentraciji od 30, 40 ili 50 mg/ml.Prethodno premazane i nepremazane papirnate trake ispitane su i uspoređene u središtu Petrijeve zdjelice.Svaka petrijeva zdjelica sadrži tridesetak aktivnih termita O. obesus.Kontrolni i testni termiti dobivali su mokri papir kao izvor hrane.Sve su ploče držane na sobnoj temperaturi tijekom cijelog perioda inkubacije.Termiti su uginuli nakon 12, 24, 36 i 48 sati89,90.Jednadžba 1 je zatim korištena za procjenu postotka smrtnosti termita pri različitim koncentracijama biosurfaktanta.(2).
Uzorci su držani na ledu i pakirani u mikroepruvete koje sadrže 100 ml 0,1 M natrijevog fosfatnog pufera (pH 7,4) i poslani u Središnji laboratorij za patologiju akvakulture (CAPL) Rajiv Gandhi Centra za akvakulturu (RGCA).Histološki laboratorij, Sirkali, Mayiladuthurai.Distrikt, Tamil Nadu, Indija za daljnju analizu.Uzorci su odmah fiksirani u 4% paraformaldehidu na 37°C tijekom 48 sati.
Nakon faze fiksacije, materijal je ispran tri puta s 0,1 M natrijevim fosfatnim puferom (pH 7,4), postupno dehidriran u etanolu i natopljen LEICA smolom tijekom 7 dana.Supstanca se zatim stavlja u plastični kalup napunjen smolom i polimerizatorom, a zatim se stavlja u pećnicu zagrijanu na 37°C dok se blok u kojem se nalazi supstanca potpuno polimerizira.
Nakon polimerizacije, blokovi su izrezani pomoću mikrotoma LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, SAD) na debljinu od 3 mm.Odjeljci su grupirani na slajdovima, sa šest odjeljaka po slajdu.Stakalca su osušena na sobnoj temperaturi, zatim obojena hematoksilinom 7 minuta i isprana tekućom vodom 4 minute.Osim toga, nanesite otopinu eozina na kožu 5 minuta i isperite tekućom vodom 5 minuta.
Akutna toksičnost je predviđena korištenjem vodenih organizama s različitih tropskih razina: 96-satni LC50 za ribe, 48-satni LC50 za D. magna i 96-satni EC50 za zelene alge.Toksičnost ramnolipidnih biosurfaktanata za ribe i zelene alge procijenjena je pomoću softvera ECOSAR verzije 2.2 za Windows koji je razvila Agencija za zaštitu okoliša SAD-a.(Dostupno online na https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Svi testovi za larvicidnu i antitermitnu aktivnost provedeni su u tri primjerka.Nelinearna regresija (log varijabli odgovora na dozu) podataka o mortalitetu ličinki i termita provedena je kako bi se izračunala srednja letalna koncentracija (LC50) s 95% intervalom pouzdanosti, a krivulje odgovora na koncentraciju generirane su korištenjem Prism® (verzija 8.0, GraphPad Software) Inc., SAD) 84, 91.
Ova studija otkriva potencijal mikrobnih biosurfaktanata koje proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 kao larvicidnih i antitermitnih sredstava za komarce, a ovaj će rad pridonijeti boljem razumijevanju mehanizama larvicidnog i antitermitnog djelovanja.Histološka istraživanja ličinki tretiranih biosurfaktantima pokazala su oštećenje probavnog trakta, srednjeg crijeva, moždane kore i hiperplaziju intestinalnih epitelnih stanica.Rezultati: Toksikološka procjena antitermitne i larvicidne aktivnosti ramnolipidnog biosurfaktanta kojeg proizvodi Enterobacter cloacae SJ2 otkrila je da je ovaj izolat potencijalni biopesticid za kontrolu vektorskih bolesti komaraca (Cx quinquefasciatus) i termita (O. obesus).Postoji potreba za razumijevanjem temeljne toksičnosti biosurfaktanata za okoliš i njihovih potencijalnih utjecaja na okoliš.Ova studija pruža znanstvenu osnovu za procjenu rizika biosurfaktanata za okoliš.
Vrijeme objave: 9. travnja 2024